Da cuenta de los habitantes y las culturas que poblaron los actuales territorios de Antioquia y Colombia. Dispuestas en un sentido cronológico, la sala exhibe un gran número de objetos que van desde fósiles de animales que viveron en América antes de la llegada de los primeros pobladores, hasta un enterramiento humano hallado en el sector de Porce, pasando por piezas líticas, cerámicas, de orfebrería y otras de carácter etnográfico.